Transcript
Ein Vergleich von Coxiellose und Paratuberkulose dient dem Verständnis Jens Böttcher
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V., Senator-Gerauer-Str. 23, D-85586 Poing,
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V. © Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
C. burnetii und M. avium ssp. paratuberculosis Intrazelluläre Erreger Infektion von Makrophagen Strategien der Immunevasion Erregerpersistenz viele infizierte/immune Tiere ↔ einzelne chronisch infizierte Tiere Hochausscheider mit starken Antikörperreaktionen Entgleisung der Immunantwort multi- und paucibacilläre Form
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Der rote Faden des Vortrags •
Bedeutung
•
Fokus der Diagnostik: Chronische Infektion
•
Lösungsansatz: Merzung chronisch-infizierter Tiere und Vermeidung chronischer Infektionen durch Impfung
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Ist MAP in der Milch eine ernste Bedrohung? 2 infizierte Bestände; 106 Einzelmilchproben Einzelmilch-PCR: alle negativ, Wie gut ist die Kot-PCR im Vergleich zur Kotkultur?
Kotkultur
KotPCR
neg
pos
∑
neg
689
2
691
pos
20
11
31
∑
709
13
722
Fazit: Sicherheit Milch: Kotkontamination, Melkhygiene.
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Coxiella burnetii in der Milch? n Bestände
12
Einzelmilchproben
824
POSITIV
45
Prozent (CI95%)
5.5% (3,9-7,3%)
Seroprävalenz: 2003: (kommerzieller Test; CHEKIT) 603 Milchviehbestände, 21051 Proben 72,8% Herdenprävalenz 14.2% Einzeltierprävalenz 9. Stendaler Symposium
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Coxiellen in der Milch: Alle Viertel beproben! Kuh
C.b./ml)* (Mittel)
PCR VL)*
PCR HL)*
PCR HR)*
PCR VR)*
49916
0,7
2,76
0
0
0
93380
0,8
0
0
0
3,09
93340
1,7
0
n.d.
0
5,11
49885
1,9
0
3,51
0
4,24
93361
2,1
4,67
3,61
0
0
93379
4,4
4,8
4
4,45
4,16
64 Tiere
neg
neg
neg
neg
neg
)* log10 Coxiellen/ml
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Tierseuchenbekämpfung in Deutschland Wir sind auf Eradikation gepolt!
Hauttest Zelluläre Immunität
Tankmilchuntersuchung als Kontrolle freier Bestände; hohe Sensitivität!
Brucellose
BHV1
Enzootische Leukose
BVDV
Tuberkulose Flächenimpfung ohne Diagnostik
MKS
Aujeszkysche Krankheit
Differenzierung PI/TI-Tiere
DIVA-Konzept Markervakzine und Diagnostik
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Ist BVDV richtungsweisend?
• Merzung persistent-infizierter Tiere • Impfung Kontrolle transienter Infektionen Vermeidung neuer PI-Tiere
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Konsequenz für Coxiellose und Paratuberkulose chronisch • Merzung persistent-infizierter Tiere • Impfung „transienter“ Kontrolle transienter Infektionen ChronischChronisch-infizierter Vermeidung neuer PI-Tiere
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Erregernachweise akut
–
intermittierend
–
chronisch
Das unselektive Merzen von Kühen, die Erreger ausscheiden, verursacht auch einen wirtschaftlichen Schaden!
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Formel zur Vermeidung von Justizirrtümern
"Qpcr-cycling" by Zuzanna K. Filutowska - Own work. Licensed under CC BY-SA 3.0 via Wikimedia Commons http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Qpcr-cycling.png#/media/File:Qpcr-cycling.png
PCR Ausscheider
+ +
„ELISA-sandwich“ von Jeffrey M. Vinocur - Eigenes Werk. Lizenziert unter CC BY 2.5 über Wikimedia Commons - http://commons.wikimedia.org/wiki/File:ELISAsandwich.svg#/media/File:ELISA-sandwich.svg
ELISA immunologisches Versagen
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Zwei Akteure der Coxiellose Ausscheidung
nur puerperal
Milch
Phasenmuster
>> PhII+/PhI-
>> PhII+/PhI+
PhI-Titer
< 100
Ø 1000
PhII-Titer
Ø 1000
Ø 5000
IFN-γ
+++
(+)
IFN-γ post vacc
↑↑↑
↑→
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Impfung Coxiellose September 2012: Abkalbung der geimpften Färsen.
Aktueller Stand
März 2010
August 2010
Milch-PCR Puerperal Tupfer-PCR
Juni 2011 Impfung der Färsen Juni 2012
Impfung der Kühe
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Coxiellose-Lösungsvorschlag Schritt 1: Identifikation der chronisch-infizierten Tiere (Phase I-Titer >200 + Erregernachweis) Schritt 2: Impfung (Coxevac®) Schritt 3: Kontrolle der chronisch-infizierten Tiere (ggf. Merzung)
akut
–
intermittierend
–
chronisch
Impfung, Verhinderung chronischer Infektionen -
Merzung
Wir haben für die Coxiellose-Kontrolle sinnvolle Handlungsoptionen!
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Paratuberkulose-Bestände (n=2) Umgebungsproben Einzelkotproben Einzelmilch
Zusätzlich: Blut
Tests Zeit Kultur PCR Antikörpertests (Idexx, IDVet, LSI) IFN-γ-Stimulationstest
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Zwei MAP-infizierte Bestände
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1
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1
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0 0 0 0 0 0 0
0 0
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0
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positiv (Anzahl Tests)
0
Mittlere Rate positiver Tiere
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0 0 1 0
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0 3
0
0 3
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0 0 2 0 0 0
0 0
0
3 3 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2
0 0 1 0 0 0
0 2 0
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2 1 0 0
0
1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2
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0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
1 0 0
0 1 0
2 0 0
3,1%
Erreger
6,2%
0
1 0 0 0 0 0 0 0
16,5%
0
0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
IFN-γ
42,3%
46,5%
0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0
0 1
0 0
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0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
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1 1
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0 0
12,9%
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0
0 0 0 0 0
0
Antikörper
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3 0 0
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© Jens Böttcher
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0
2 0 0 2 0 3
1411
1 1
1409
0
1 0
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0
1404
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1402
377 379 382 385 400 403 408 413 417 419 420 425 426 433 439 444 445 446 450 451 452 453 456 457 463 465 466 467 468 469 471 475 476 477 478 480 482 483 485 487 489 490 491 493 494 495 496 498 500 502 503 505 506 508 509 510 511 512 513 514 515 516 517 518 519 520 521 522 523 524 525 526 528 529 530 531 532 533 535 536 537 538 539 540 541 542 543 545 546 547 548 550 551 579 70897 563 585
1311
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ID
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Die letzten Kälber von klinisch kranken Kühen! 1 1
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1406
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0
1402
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negativ
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1411
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1504
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1408
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1305
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1307
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0 0
2 0 0 0 0 0 3
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Antikörper
IFN-γ
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0 0
1406
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0 0
0 0
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0 0
1404
0
537 567 577 585 603 608 619 623 629 636 637 646 648 649 650 652 653 655 657 658 661 662 664 665 667 668 669 671 674 675 676 677 678 679 680 681 682 683 684 685 686 687 688 689 690 691 693 694 696 697 698 699 701 702 704 705 706 707 708 709 710 711 712 713 714 715 716 718 719 722 723 724 725 727 728 730 732 733 734
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Serologie
Antikörper 1402
1402
0
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0 0
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IFN-γ 1408
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Erreger
Erreger
Antikörper
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IFN-γ
1310
Erreger
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0 0
1 0 3 3
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Einfluss der Antikörper (in-vitro-Versuch) Parasitophore Vakuole C. burnetii
Opsonierte Coxiellen
Phase I-Antikörper
Fc-Rezeptor
IL-10 ↑↑↑
Desnues et al, 2009: Role of specific antibodies in Coxiella burnetii infection of macrophages. Clinical Microbiology and Infection, Vol. 15, Supplement 2, 161-162
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V. © Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Einfluss der Antikörper auf MAP-Infektion
Chronische Infektion • Erreger aus der Umgebung • Antikörper aus dem Kolostrum
???
Coxiellose: Mutter/Kalb Beziehungen fehlen bislang! Die Impfung scheint die Entstehung chronischer Euterinfektion zu verhindern. 9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V. © Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Entstehung chronischer Infektionen
Paratuberkulose
Coxiellose (Hypothese)
Kälber
Kuhstall Infektion naiver Tiere
Kälber von Hochausscheidern
Galaktogene Infektion naiver Tiere?
Hochausscheider im finalen Stadium haben Antikörper
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V. © Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Der rote Faden des Vortrags •
Bedeutung: Coxiellose > Paratuberkulose
•
Diagnostik der chronischen Infektion: Erreger + Antikörper
•
Lösungsansatz: Diagnose der chronischen Infektion und Impfung
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V. © Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Danksagung Diese Studie wurde mit finanzieller Unterstützung des Freistaates Bayern und der bayerischen Tierseuchenkasse durchgeführt.
Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit.
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V. © Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
