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Mycophenolsäure (MPA) Homogener enzymatischer Assay für die quantitative Bestimmung der Gesamt-MPA in Serum oder Plasma Indikation Mycophenolsäure (Mycophenolic Acid – MPA) wird zur immunsuppressiven Therapie nach Nieren- oder Herztransplantationen eingesetzt. Klinische Studien belegen, dass therapeutisches Drug Monitoring (TDM) von MPA den therapeutischen Nutzen des Medikaments maximieren und negative Effekte minimieren kann.1 – 5 In der Regel wird MPA in Kombinationstherapie mit Calcineurin-Inhibitoren (Cyclosporin oder Tacrolimus) oder Zellzyklus-Hemmern (wie Sirolimus) verabreicht.1,6 Die Pharmakokinetik von MPA variiert stark zwischen Patienten und kann in speziellen Patientengruppen aufgrund von Begleiterkrankungen oder Wechselw irkungen mit anderen Immunsuppressiva verändert sein.7 – 9 Aufgrund der Variabilität von MPA-Konzentrationen im Plasma von Patienten, kann die Überwachung der MPA-Konzentrationen dazu beitragen, das Risiko einer Abstoßung des Transplantats bei Hochrisikopatienten zu reduzieren.6,10 Testprinzip: Homogener enzymatischer Immunoassay Inosine 5'-Phosphat + NAD+ + H 2 O Xanthosin 5'- Phosphat + NADH + H+ Kein Medikament in der Probe
IMP
NAD+
XMP
Medikament in der Probe NADH
IMP
NAD+
XMP
NADH
Enzym ist durch MPA geblockt – Keine Freisetzung von NADH
XMP
NADH XMP
NADH XMP
MPA
XMP
MPA
Der Total MPA Test von Roche besteht aus zwei Reagenzien und enthält IMP (Inosinmonophosphat), NAD (Nicotinamid-adenin-dinucleotid) sowie das mutierte Enzym IMPDH‑II (Inosinmonophosphatdehydrogenase). Die zur Messung der MPA-Konzentrationen in Serum oder Plasma verwendeten Reagenzien imitieren den In-vivo-Mechanismus des Enzyms. IMPDH-II bildet in vivo mit IMP und NAD einen Komplex. NAD wird zu NADH reduziert und IMP zu XMP umgewandelt. NADH verlässt zuerst das Enzym. Ist MPA vorhanden, wird XMP nicht von dem Enzym freigesetzt. Bei dem Total MPA Test von Roche verbindet sich eine festgelegte Menge mutierter IMPDH mit festgelegten Mengen IMP und NAD in den Reagenzien. Die Bildung von NADH wird bei 340 nm gemessen. Ist MPA in der Serum- oder Plasmaprobe vorhanden, wird die Bildung von NADH durch die Reagenzien gehemmt, was dann als abnehmendes Signal bei 340 nm gemessen wird. Die MPA-Konzentration ist umgekehrt proportional zur Bildungsgeschwindigkeit von NADH. Die Reaktion wurde für eine nicht‑lineare Sechs‑Punkt-Kalibration optimiert.
Merkmale des Gesamt-Mycophenolsäure Tests cobas c 701 / 702 Modul System Kompatibilitat cobas c 311 analyzer cobas c 501 / cobas c 502 Modul COBAS INTEGRAT 400 plus analyzer Testdauer 10 Minuten Testprinzip Homogener enzymatischer Immunoassay Rückführbarkeit Die Methode ist auf eine primäre Referenzmethode (HPLC) rückführbar. Probenmaterial Serum, Plasma Probenvolumen 3 µl Messbereich 0,4 – 15 µg/mL (1,2 – 46,8 µmol/L) erweiterter Messbereich: 0,4 – 50 µg/mL (1,2 – 156,1 µmol/L) cobas c 701 Modul COBAS INTEGRAT 400 plus analyzer Wiederholpräzision cobas c 501 Modul 0,868 µg/mL = 1,7 % 1,55 µg/mL = 1,7 % 1,51 µg/mL = 1,9 % 1,44 µg/mL = 1,4 % 9,11 µg/mL = 0,8 % 6,22 µg/mL = 1,3 % 12,1 µg/mL = 1,2 % COBAS INTEGRAT 400 plus analyzer Zwischenpräzision cobas c 501 Modul n.a.* 1,51 µg/mL = 2,4 % 1,55 µg/mL = 3,0 % 6,22 µg/mL = 1,8 % 9,11 µg/mL = 0,9 % * Die Ergebnisse der Zwischenpräzision stammen vom cobas c 501 Modul als Mastersystem.
Bestellinformationen Produkt cobas c pack MPA cobas c pack large MPA Gesamt-MPA Kalibratoren Gesamt-MPA Kontrollen
Inhalt 100 Tests 100 Tests 1 × 5 mL 2 × 5 mL je Level 1 – 3
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7. Cox, V.C., Ensom, M.H.H. (2003). Mycophenolate mofetil for solid organ transplantation: Does the evidence support the need for clinical pharmacokinetic monitoring? Ther Drug Monit. (25)2, 137-157. 8. Shaw, L.M., Korecka, M., Venkataramanan, R., et al. (2003) Mycophenolic acid pharmacodynamics and pharmacokinetics provide a basis for rational monitoring strategies. Am J Transplant 3, 534–542. 9. Shaw, L.M., Holt, D.W., Oellerich, M., et al. (2001). Current issues in therapeutic drug monitoring of mycophenolic acid: Report of a roundtable discussion. Ther Drug Monit. 23(4). 305–315. 10. Meiser, B.M., Pfeiffer, M., Schmidt, D., et al. (1999). Combination therapy with tacrolimus and mycophenolate mofetil following cardiac transplantation: importance of mycophenolic acid therapeutic drug monitoring. J Heart Lung Transplant 18(2). 143–149.
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