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Praktikum : Immun Histo Chemie
practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Histologie: Wissenschaft von biologischen Geweben
ApoEko, male
Histologie in der Klinikroutine
practical course Entnahme von Organ- oder Organteil
Fixierung und Begutachtung / Bericht
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Darstellungen entnommen: Fachbuch „Histotechnik“ von Gudrun Lang
Histologie in der Klinikroutine
practical course
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T1 Tumor 2,0 cm oder weniger in größter Ausdehnung T1mi Mikroinvasion 0,1 cm oder weniger in größter Ausdehnung T1a Mehr als 0,1 cm, aber nicht mehr als 0,5 cm in größter Ausdehnung T1b Mehr als 0,5 cm, aber nicht mehr als 1,0 cm in größter Ausdehnung T1c Mehr als 1,0 cm, aber nicht mehr als 2,0 cm in größter Ausdehnung T2 Tumor mehr als 2,0 cm, aber nicht mehr als 5,0 cm in größter Ausdehnung T3 Tumor mehr als 5,0 cm in größter Ausdehnung T4 Tumor jeder Größe mit direkter Ausdehnung auf Brustwand (T4a)/ Haut (T4b), beides (T4c) oder inflammatorisches Karzinom (T4d) 24 ÄP Gynäkologie 3_2014 Tab. 3: TNM-Klassifikation 2010. Aerztekammer – bw.de ÄP Gynäkologie 3_2014
Histologie in der Klinikroutine
practical course Entwässerung und Einbettung, Schneiden - Färben
Mikroskopische Analyse
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Darstellungen entnommen: Fachbuch „Histotechnik“ von Gudrun Lang
Die Histologie in der Klinikroutine:
practical course
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Frühdiagnose von Tumoren Klassifizierung von Tumoren Nachweis von Stoffwechselerkrankungen Parasitäre oder bakterielle Erkrankungen Hilfe bei der Therapiewahl
Makro(skopische)- und Mikro(skopische)- analysen
practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Der erste Schritt nach der Entnahme: die Fixierung
practical course
Formalin
Alkolhol
nativ
Die Art der Fixierung wird bestimmt durch die Fragestellung: Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Was möchte ich wissen? Reine Strukturanalyse oder Färbung? Welche Färbung soll zum Einsatz kommen? Was soll gefärbt werden?
Die „Einbettung“ als Vorbereitung zum Schneiden und Aufziehen auf Objektträger
practical course
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Schneidetechniken in der Histologie: Paraffinschnitte practical course
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Natives Material Vibratom
Ultramikrotom für Elektronenmikroskopie
Gefrierschnitte
Schneidetechniken in der Histologie: Gefrierschnitte: practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Färbetechniken in der Histologie:
practical course
Farbreaktionen durch Ionenbindung: Saure Farbstoffe binden an basische Proteine Beispiel: H&E ( Kerne blau, Cytoplasma rot ) Enzymhistochemisch: zelleigene Enzyme bewirken die Farbentwicklung Immunhistochemie: Antigen - Antikörperbindung mit anschließender Chemischer Farbreaktion
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
In- situ Hybridisierung: Nukleinsäuresequenzen dienen als „Bindungssonden“ Und werden über eine chemische Farbreaktion sichtbar Gemacht - oder es wird eine Fluoreszens gekoppelte Nukleinsäuresequenz eingesetzt - FISH
Einsatz in unserem Labor:
practical course
Katerina Vlantis Katerina Vlantis
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
ApoEko, male
Apostolis Polykratis
Einsatz in unserem Labor:
Chun Kim
practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Unser Versuch heute: Immunhistochemie
practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Durch den Einsatz von Antikörper werden Verschiedene Zelltypen in einem Organ Markiert, die Antikörperbindung Wird durch eine chemische Farbreaktion sichtbar
Unser Versuch heute: Immunhistochemie
practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Unser Versuch heute: Immunhistochemie
practical course
Mouse genetics and inflammation Pasparakis group
Aceton - Fixierung Blocken unspezifischer Bindungsstellen Antikörper Bindungsreaktion Sekundär - Antikörper mit HRP Chromogen (DAB)
Viel Spaß beim Färben ! Vielen Dank an Elza Mahlberg für die Herstellung der Schnitte. Vielen Dank an Edeltraud Stade und Bianca Kühnel für die Testfärbung und die Bereitstellung der Reagenzien.