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Präsentation Immunhistochemie

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Praktikum : Immun Histo Chemie practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Histologie: Wissenschaft von biologischen Geweben ApoEko, male Histologie in der Klinikroutine practical course Entnahme von Organ- oder Organteil Fixierung und Begutachtung / Bericht Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Darstellungen entnommen: Fachbuch „Histotechnik“ von Gudrun Lang Histologie in der Klinikroutine practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group T1 Tumor 2,0 cm oder weniger in größter Ausdehnung T1mi Mikroinvasion 0,1 cm oder weniger in größter Ausdehnung T1a Mehr als 0,1 cm, aber nicht mehr als 0,5 cm in größter Ausdehnung T1b Mehr als 0,5 cm, aber nicht mehr als 1,0 cm in größter Ausdehnung T1c Mehr als 1,0 cm, aber nicht mehr als 2,0 cm in größter Ausdehnung T2 Tumor mehr als 2,0 cm, aber nicht mehr als 5,0 cm in größter Ausdehnung T3 Tumor mehr als 5,0 cm in größter Ausdehnung T4 Tumor jeder Größe mit direkter Ausdehnung auf Brustwand (T4a)/ Haut (T4b), beides (T4c) oder inflammatorisches Karzinom (T4d) 24 ÄP Gynäkologie 3_2014 Tab. 3: TNM-Klassifikation 2010. Aerztekammer – bw.de ÄP Gynäkologie 3_2014 Histologie in der Klinikroutine practical course Entwässerung und Einbettung, Schneiden - Färben Mikroskopische Analyse Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Darstellungen entnommen: Fachbuch „Histotechnik“ von Gudrun Lang Die Histologie in der Klinikroutine: practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Frühdiagnose von Tumoren Klassifizierung von Tumoren Nachweis von Stoffwechselerkrankungen Parasitäre oder bakterielle Erkrankungen Hilfe bei der Therapiewahl Makro(skopische)- und Mikro(skopische)- analysen practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Der erste Schritt nach der Entnahme: die Fixierung practical course Formalin Alkolhol nativ Die Art der Fixierung wird bestimmt durch die Fragestellung: Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Was möchte ich wissen? Reine Strukturanalyse oder Färbung? Welche Färbung soll zum Einsatz kommen? Was soll gefärbt werden? Die „Einbettung“ als Vorbereitung zum Schneiden und Aufziehen auf Objektträger practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Schneidetechniken in der Histologie: Paraffinschnitte practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Natives Material Vibratom Ultramikrotom für Elektronenmikroskopie Gefrierschnitte Schneidetechniken in der Histologie: Gefrierschnitte: practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Färbetechniken in der Histologie: practical course Farbreaktionen durch Ionenbindung: Saure Farbstoffe binden an basische Proteine Beispiel: H&E ( Kerne blau, Cytoplasma rot ) Enzymhistochemisch: zelleigene Enzyme bewirken die Farbentwicklung Immunhistochemie: Antigen - Antikörperbindung mit anschließender Chemischer Farbreaktion Mouse genetics and inflammation Pasparakis group In- situ Hybridisierung: Nukleinsäuresequenzen dienen als „Bindungssonden“ Und werden über eine chemische Farbreaktion sichtbar Gemacht - oder es wird eine Fluoreszens gekoppelte Nukleinsäuresequenz eingesetzt - FISH Einsatz in unserem Labor: practical course Katerina Vlantis Katerina Vlantis Mouse genetics and inflammation Pasparakis group ApoEko, male Apostolis Polykratis Einsatz in unserem Labor: Chun Kim practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Unser Versuch heute: Immunhistochemie practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Durch den Einsatz von Antikörper werden Verschiedene Zelltypen in einem Organ Markiert, die Antikörperbindung Wird durch eine chemische Farbreaktion sichtbar Unser Versuch heute: Immunhistochemie practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Unser Versuch heute: Immunhistochemie practical course Mouse genetics and inflammation Pasparakis group Aceton - Fixierung Blocken unspezifischer Bindungsstellen Antikörper Bindungsreaktion Sekundär - Antikörper mit HRP Chromogen (DAB) Viel Spaß beim Färben ! Vielen Dank an Elza Mahlberg für die Herstellung der Schnitte. Vielen Dank an Edeltraud Stade und Bianca Kühnel für die Testfärbung und die Bereitstellung der Reagenzien.